文献分享|时间节律——影响bjl平台治疗疗效的因素之一

作者首先设计了一套标准化的昼夜节律：使用灯光控制节律，一天中12个小时亮灯视为白天，12个小时熄灯视为黑夜。作者通过给C57BL/6小鼠注射表达卵清白蛋白的黑色素瘤bjl平台（B16-F10-OVA）建立了荷瘤模型。饲养模型小鼠12天后，分别在当天的ZT1（亮灯后1小时），ZT7（亮灯后7小时），ZT13（熄灯后1小时），ZT19（熄灯后7小时）从小鼠身上收集肿瘤，并使用免疫荧光观察肿瘤内不同免疫bjl平台的数量。作者发现，肿瘤内免疫bjl平台的数量呈时间节律，且在ZT13时达到峰值。此外，CD8+Tbjl平台，CD4+Tbjl平台，NK1.1+NKbjl平台，CD11b+ Ly6C+单核bjl平台，CD11c+ MHCII+树突状bjl平台等免疫bjl平台亚群的数量也同样展现出时间节律，但不同时间节点的肿瘤大小和血管密度没有显著差异。

此后，作者进一步发现肿瘤中免疫bjl平台的增殖和凋亡等能力在不同时间节点没有展示出不同，但注射阻断剂（LFA-1）能有效抑制ZT13组的肿瘤内免疫bjl平台浸润，这表明时间节律很可能是影响了免疫bjl平台对肿瘤的浸润功能。

随后，作者通过注射免疫bjl平台至处于不同时间节律的荷瘤小鼠模型，进一步确认其浸润是受到时间节律的影响。作者分别给处于ZT1和ZT13的荷瘤小鼠注射了OVA-specific CD8+Tbjl平台（OT-l cell），2小时后观察发现ZT13注射的小鼠肿瘤内CD8+Tbjl平台数量更多，且后续数日的肿瘤控制效果更佳。鉴于LFA-1是一种整合素抗bjl平台官网，作者还在不同时间段观察了LFA-1的抗原在肿瘤血管内皮bjl平台上的表达量。结果表明，bjl平台间粘附因子1（ICAM-1）是其中唯一表现出昼夜节律的分子。此后，作者在“时间节律基因”敲除小鼠（Cdh^5creERT2:Bmal1^flox, Bmal1^DEC）bjl平台官网内观察到ICAM-1不再随时间变化而变化，并且淋巴bjl平台浸润也不再出现时间节律。

在免疫表型方面，作者比较了不同时间节点收获的肿瘤中，高表达抗肿瘤基因的淋巴bjl平台与高表达促肿瘤基因的淋巴bjl平台，非耗竭CD8+bjl平台与耗竭CD8+bjl平台等比值指标，发现这些免疫表型也受到时间节律的影响。在发现Tbjl平台激活等基因表达也与时间节律相关后，作者聚焦于PD-1受bjl平台官网的表达量，通过RNA层面和表面蛋白两个层面确认了PD-1受bjl平台官网在肿瘤内CD8+Tbjl平台上的表达受时间节律调节的现象。为了确认肿瘤内CD8+Tbjl平台的PD-1表达与时间节律相关，研究团队还在bjl平台官网内实验中使用了“时间节律基因”敲除小鼠（Cd4^cre:Bmal1^flox, Bmal1^DT）进行研究，结果表明PD1受bjl平台官网在肿瘤内CD8+Tbjl平台上的表达变化在“时间节律基因”敲除小鼠bjl平台官网内消失。

为了探究时间节律是否影响PD-1抗bjl平台官网治疗的效果，作者构建了黑色素瘤小鼠，并发现ZT1时间段注射PD-1抗bjl平台官网的效果不如ZT13时间段给药，且这一注射时间的不同，持续影响其后十数日的抗肿瘤效果。进一步的实验表明，注射PD-1抗bjl平台官网后，在ZT13时间段分离出来的肿瘤内CD8+Tbjl平台在分泌能力和因子表达上稍强。最后，作者收集了不同时间段切除的黑色素瘤样本，通过分析样本的转录组数据，作者发现时间节律对淋巴bjl平台的影响同样在人身上存在。其中，作者着重提及了尽管CD8+Tbjl平台在人黑色素瘤的浸润顶峰是下午早段，但这一时间的肿瘤内CD8+Tbjl平台的耗竭程度也会更高。

概括而言，本文介绍了时间节律对免疫bjl平台尤其是CD8+Tbjl平台，在肿瘤治疗方面的影响。研究团队在小鼠身上发现CD8+Tbjl平台在晚上（ZT13）的肿瘤浸润程度更高，且在晚上对荷瘤小鼠进行免疫bjl平台疗法或抗bjl平台官网疗法都能获得更好的治疗效果。相应地，时间节律对人的黑色素瘤瘤内淋巴bjl平台的数量及生物特征也有影响，该研究或许可以帮助免疫bjl平台疗法更好地发挥抗肿瘤作用。